Inducción de estructuras de novo, a partir de callos obtenidos de vitroplantas de cinchona officinalis l., de relictos boscosos de la provincia de Loja.

Abstract

Cinchona officinalis L., es una especie nativa del Valle de Loja, se encuentra desde los 2300 a los 3100 m s.n.m, se desarrolla en suelos de origen aluvial y coluvial, en climas cálidos y húmedos, con precipitaciones abundantes y nubosidad. Además, es un recurso forestal de gran interés por sus múltiples beneficios medicinales y ecológicos, y fue catalogada como la Planta Nacional del Ecuador. Mediante las técnicas de cultivo in vitro de callos y posteriormente la inducción de estructuras de novo se puede generar nuevas plantas, debido a la totipotencia celular que poseen los callos. La investigación se desarrolló en un periodo de seis meses, desde noviembre 2019 a abril 2020. El material vegetal inicial fue proveniente del germoplasma de vitroplantas de C. officinalis L. El medio de cultivo para la inducción de callos se preparó en base a las sales minerales del medio MS, suplementado con 3,0 mg/l-1 2,4D+ 0,5 mg/l-1 KIN. Para la inducción de estructuras de novo de C. officinalis L, se seleccionó las mejores estructuras callogénicas, para lo cual se realizaron dos ensayos. En el primer ensayo se evaluó el efecto de AIA-KIN, el medio de cultivo sólido se preparó en base a las sales minerales de MS y en combinaciones de AIA: 0,2 mg/l-1; 0,4 mg/l-1 y 0,6 mg/l-1 y la KIN en 1,0 mg/l-1; 2 mg/l-1; 3 mg/l-1. En el segundo ensayo se evaluó el efecto del BAP, para lo cual, el medio de cultivo se realizó en base a las sales minerales de la solución nutritiva del MS y con BAP en concentraciones de 1 mg/l-1;1,5 mg/l-1 y 2 mg/l-1; el diseño experimental utilizado fue completamente al azar. Se observó que, el mayor porcentaje de formación de estructuras de novo de C. officinalis L, en la combinación AIA-KIN fue del 17,77%, en el T1 (0,0 mg/l-1 AIA+1,0 mg/l-1 KIN) con un promedio de 15 estructuras de novo/callo y una altura de 2,87 mm. En tratamientos que tuvieron únicamente BAP en concentraciones de 1,0 mg/l-1; 1,5 mg/l-1 y 2 mg/l-1 se observó porcentajes de formación de estructuras de novo inferiores al 2%. El porcentaje de contaminación más alto (6,67%) se presentó en los tratamientos T0 (sin hormonas), T3 (0,0 mg/l-1 AIA + 3,0 mg/l-1 KIN), T5 (0,4 mg/l-1 AIA + 2,0 mg/l-1 KIN) y T6 (0,6 mg/l-1 AIA + 3,0 mg/l-1 KIN). Finalmente, el mayor porcentaje de fenolización de los explantes se evidenció en los tratamientos T1 (0,0 mg/l-1 AIA + 1,0 mg/l-1 KIN) con un 16.7% y T3 (2,0 mg/l-1 BAP) con un 13,33%. Las combinaciones hormonales AIA – KIN no ejercieron un efecto significativo sobre la cantidad y calidad de las estructuras de novo y con el uso de una sola citoquinina BAP se evidenció que a medida que se incrementó la concentración de BAP, el porcentaje de formación de estructuras de novo fue menor.

Palabras claves: Cinchona officinalis, quinina, cascarilla, organogénesis, callos, estructuras de novo, reguladores de crecimiento, inducción.