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Título : Procesos biotecnológicos para la propagación in vitro de Cinchona officinalis L., a partir de diferentes fuentes de materia vegetal
Autor : Moreno Serrano, José Antonio
Lima Jiménez, Nelson Ramiro
Palabras clave : PROPAGACIÓN VEGETATIVA
CINCHONA OFFICINALIS L.
BIOTECNOLOGÍA VEGETAL
CULTIVO IN VITRO
Fecha de publicación : 2016
Editorial : Loja: Universidad Nacional de Loja
Resumen : La Cascarilla Cinchona officinalis L, es una especie endémica y nativa del valle de Loja, es considerada como uno de los géneros de mayor importancia por su valor medicinal; lo cual ha causado una sobre explotación superando los límites de regeneración natural; es por ello que se encuentra en peligro de extinción. La micropropagación vegetal es una herramienta útil para la conservación de especies amenazadas, mediante las técnicas de cultivo in vitro se puede incrementar el número de individuos por unidad de superficie de cualquier especie. En este contexto la micropropagación de Cinchona officinalis L., se realizó con el propósito de generar información sobre los procesos biotecnológicos, que permitan la propagación in vitro de la especie con fines de conservación. La presente investigación se desarrolló dentro del marco del proyecto “Identificación y descripción del estado actual de Cinchona officinalis L., en la provincia de Loja y generación de protocolos para la propagación in vivo e in vitro”, en dos fases: de campo y de laboratorio; dentro el periodo comprendido entre mayo 2015 – enero 2016. La fase de campo correspondió a la recolección de material vegetal en los sectores de Loja: en las quebradas del Naque y San Simón, Catamayo sitio Uritusinga y en Saraguro en la parroquia Selva Alegre, sitio Santa Lucía; y, la segunda fase se llevó acabo en el Laboratorio de Micropropagación Vegetal de la Universidad Nacional de Loja. En la fase de laboratorio se utilizó el medio de cultivo basal MS (Murashige y Skoog 1962), suplementado con diversos reguladores de crecimiento. Para el ensayo de desinfección de semillas se aplicó hipoclorito de sodio (Ajax) en tres concentraciones (15, 25 y 50 %) en tres tiempos de inmersión (5, 10 y 15 min.) respectivamente, donde los mejores tratamientos para controlar la contaminación fue 50 % de hipoclorito de sodio, durante 5, 10 y 15 min. Para la germinación in vitro de semillas se adicionó al medio de cultivo ácido giberélico (AG3) en tres concentraciones (0,0; 0,5 y 1,0 mg/l); encontrándose el mayor porcentaje de germinación (74,44 %) en el T3, con una concentración de 1,0 mg/l de AG3. Para el ensayo de multiplicación in vitro de explantes, se utilizó tres reguladores de crecimiento, la auxina: ácido naftalenacético (ANA) y dos citoquininas: benzilaminopurina (BAP) y kinetina (KIN), en dos concentraciones 0,2 y 2,0 mg/l respectivamente, logrando los mejores resultados en la combinación hormonal de 0,2 ANA + 2,0 BAP; el mismo que permitió obtener 4,73 brotes desarrollados, con 0,83 cm de altura, 27 hojas y 12,10 nudos promedio formados por cada explante. La presente investigación permitió ensayar los procesos biotecnológicos para la propagación in vitro de Cinchona officinalis L. con la finalidad de emprender en el futuro en programas de mejoramiento genético, forestación y reforestación de la especie, que permita la recuperación de ecosistemas nativos degradados especialmente de la región sur del Ecuador.
Descripción : The Cascarilla Cinchona officinalis L., is a native and endemic species of the Valley of Loja, it is considered as one of the most important genres for its medicinal value; which has caused over exploitation exceeding the limits of natural regeneration; The refore, it is in danger of extinction. Plant micropropagation is a useful tool for the conservation of endangered species, by using the techniques of in vitro culture you can increase the number of individuals per unit area of any species. In this context the micropropagation of Cinchona officinalis L., was carried out in order to generate information on biotechnological processes, which allow the in vitro propagation of the species for conservation purposes. This research was developed within the framework of the project "identification and description of the current state of Cinchona officinalis L., in the province of Loja, and generation of protocols for in vivo and in vitro propagation", in two phases: field and laboratory; within the period between May 2015 - January 2016. The field phase corresponded to the collection of plant material in the areas of Loja: in the streams of the Naque and San Simon, Catamayo, Uritusinga sites and Saraguro in Selva Alegre parish, and the second phase was conducted in the laboratory of plant micropropagation of the Universidad Nacional de Loja. The laboratory phase was used in MS (Murashige and Skoog, 1962) basal culture medium, supplemented with different plant growth regulators. For disinfection of seed testing was applied (Ajax) sodium hypochlorite at three concentrations (15, 25 and 50%) in three times of immersion (5, 10 and 15 min.) respectively, where the best treatments to control pollution was 50% sodium hypochlorite for 5, 10 and 15 min. For the in vitro germination of seeds was added to the culture medium (AG3) gibberellic acid in three concentrations (0,0; 0,5 and 1,0 mg/l); finding the highest percentage of germination (74,44%) in T3, with a concentration of 1,0 mg/l of AG3. To test in vitro propagation of explants, used three regulators of growth, the Auxin: naphthaleneacetic acid (ANA) and two cytokinins: benzilaminopurina (BAP) and kinetin (KIN), in two concentrations 0,2 and 2,0 mg/l respectively, achieving the best results in the hormone combination of 0,2 ANA 2.0 BAP; the same one that allowed 4,73 developed buds, with 0,83 cm height, 27 leaves and 12,10 average knots formed by each explant. This research allowed to rehearse the biotechnological processes for the in vitro propagation of Cinchona officinalis L. in order to undertake in the future programs of breeding, afforestation and reforestation of the species, which allow the recovery of native ecosystems degraded especially in the Southern region of the Ecuador.
URI : http://dspace.unl.edu.ec/jspui/handle/123456789/13520
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