Procesos biotecnológicos para la implantación e inducción de callos en Cinchona officinalis L., a partir de plántulas del invernadero, a nivel de laboratorio en la provincia de Loja.

Abstract

Cinchona officinalis L, es una especie nativa de la provincia de Loja, considerada como uno de los géneros de mayor importancia por su valor medicinal, cultural e histórico, conocida como el Árbol Nacional del Ecuador (Anda, 2002); entre los siglos XVII y XIX, debido a la sobreexplotación y alteración de su ecosistema, las poblaciones de C. officinalis L., fueron amenazadas, provocando la desaparición de la especie en muchos sitios de la provincia. Actualmente C. officinalis L., se encuentra en la categoría amenazada por su alta dificultad de propagación “in vivo”, y la muy baja tasa germinación de sus semillas, aunque todavía se pueden encontrar individuos aislados en potreros, formando pequeños relictos boscosos (Menesses, 2017).

La micropropagación vegetal es una herramienta para la conservación de especies amenazadas, mediante las técnicas de cultivo in vitro se puede incrementar el número de individuos por unidad de superficie de cualquier especie; así como también, permite conservar recursos fitogenéticos que presentan dificultades para propagarse y mantenerse en su medio natural.

Bajo esta perspectiva, la investigación se realizó con el propósito de aportar con protocolos para la micropropagación de Cinchona officinalis L., en las fases de implantación e inducción de callos de explantes provenientes de plántulas codificadas del invernadero, con fines de conservación y mejoramiento genético. El presente trabajo de investigación fue parte del proyecto macro “Procesos biotecnológicos para iniciar el mejoramiento genético de Cinchona officinalis L., provenientes de relictos boscosos de la provincia de Loja”, el mismo que se viene ejecutando en el Laboratorio de Micropropagación Vegetal de la Universidad Nacional de Loja.

Para la obtención del material vegetal para la fase de implantación e inducción de explantes de C. Officinalis L., se colectaron de plántulas codificadas de 5 a 15 cm de altura del invernadero del sitio de estudio: Uritusinga. En la fase de desinfección de explantes se aplicó hipoclorito de sodio (NaClO) al 25,00 %; 50,00 % y 75,00 % y peróxido de hidrógeno H2O2 al 5,00 %: 10,00 % y 15,00 %, durante 10 minutos respectivamente, los explantes desinfectados se inocularon en medio cultivo sólido de Murashige y Skoog (MS, 1962) suplementado con vitaminas. La desinfección con NaClO al 50,00 % y 75,00 % durante 10 minutos, resultó más efectivo, en el control de la contaminación de explantes, en un 40,00 %.

Para la fase de inducción de callos, los explantes se cultivaron en medio de cultivo MS sólido, suplementado con la auxina y citoquinina en diferentes concentraciones: 2-4 D en concentraciones de 1,00; 2,00 y 3,00 mg L^(-1) más kinetina al 0,50 mg L^(-1) respectivamente. Se observó que la combinación de los dos reguladores de crecimiento resultaron efectivos para la obtención de estructuras callogénicas. Así, la combinación de auxina y citoquinina resultó ser la más efectiva, obteniéndose 73,30 % de formación de callos en el tratamiento 7 (3,00 2-4 D mg L^(-1) + 0,50 mg L^(-1) KIN).

Palabras Claves: Cinchona officinalis L, desinfección, inducción, callos, cascarilla.