Procesos morfogénicos in vitro de cedro (Cedrela montana Moritz ex Turcz.) inducidos, a partir de semillas, para propagación y conservación de germoplasma.

Abstract

Con el objeto de multiplicar y preservar en condiciones in vitro a mediano plazo ejemplares sobresalientes de especies forestales importantes, en el contexto del proyecto de innovación tecnológica entre la Universidad Nacional de Loja, como entidad ejecutora, y el Ministerio de Industria y Productividad (MIPRO), como entidad financiadora. El presente trabajo de investigación se desarrolló, en el marco de un amplio programa de reforestación. Entre las especies de interés comercial que se pretende rescatar se cuenta a Cedrela montana (MELIACEAE), conocida vulgarmente como “cedro blanco”. En este contexto, en la presente investigación se realizaron pruebas de germinación de semillas, proliferación y elongación de brotes, enraizamiento y conservación de germoplasma, así como ensayos preliminares sobre inducción de callos, organogénesis y embriogénesis somática. En todos los experimentos se utilizaron las sales minerales Murashige y Skoog (MS) suplementadas con diversos reguladores de crecimiento. En los ensayos sobre geminación in vitro de semillas se utilizó ácido giberélico (AG) 1 y 2mg/L, alcanzándose la mayor tasa de germinación con 72% en la concentración AG 2 mg/L. En la elongación y proliferación de brotes se utilizaron como explantes ápices caulinares y segmentos nodales, ensayándose las citocininas benzilaminopurina (BAP), 6-furfurilaminopurina o Kinetina (KIN) y 2- sopenteniladenina (2iP) en concentraciones de 1 y 2 mg/L destacando BAP 2 mg/L. En los explantes elongados y brotados se indujo enraizamiento de novo con ácido indolbutírico (AIB) y ácido indolacético (AIA) en diferentes concentraciones, resultando AIB 1 mg/L y las sales minerales MS, a la mitad de la concentración, como el mejor tratamiento. En la inducción de callos friables se utilizó las auxinas ácido 2,4diclorofenoxiacético (2,4-D), ácido naftaleneacético (ANA) y AIA 1 y 2 mg/L. En lo referente a la inducción de embriogénesis somática, se utilizó como explantes hipocótilos y embriones maduros e inmaduros en varias combinaciones de 2,4-D, ANA, AIA y Dicamba, en concentraciones de 0.5 - 2 mg/L, con el mayor porcentaje de inducción de callos con apariencia embriogénica en la interacción Dicamba 0.5 – 2,4-D 3 mg/L. En la inducción a organogénesis se utilizaron las citocininas BAP, KIN y 2IP en concentraciones 1, 3 mg/L, suplementadas con Sulfato de adenina 5 y 10 mg/L y agua de coco 20%. El mayor porcentaje de formación de callos con apariencia organogénica se observó en la combinación agua de coco 20%+ BAP 3 mg/L, utilizando como explantes segmentos de hipocótilos. En la inducción a organogénesis somática se emplearon BAP, KIN y 2IP en concentraciones 1, 2 y 3 mg/L respectivamente combinado con Sulfato de adenina en concentraciones de 5 y 10 mg/L, pero al probar la adición de 20% de coco agua más 3mg/L de BAP promovió los mayores porcentajes de tamaño de callo a partir de segmentos de hipocótilos. En la conservación in vitro de germoplasma se utilizó plántulas de semillas germinadas, con raíz y sin raíz, bajo condiciones limitantes de crecimiento, utilizando ácido abscísico (ABA) y el osmoregulador manitol, en un lapso de 6 meses, observándose la mayor limitación en el crecimiento en los explantes con raíz, en el tratamiento ABA 0.1 mg/L, además de una baja tasa de mortalidad y alto porcentaje de supervivencia en el subcultivo.