Evaluación de la dimetilacetamida como crioprotector de espermatozoides epididimarios bovinos seleccionados con percoll

Abstract

El avance de las Biotecnologías de la reproducción permite la conservación del material genético de diversas especies de interés comercial, en peligro de extinción, o que no pueden continuar con su proceso reproductivo fisiológico. El uso de crioprotectores adecuados permite la criopreservación seminal de forma exitosa. El objetivo del presente estudio fue evaluar la dimetilacetamida como crioprotector de espermatozoides epididimarios bovinos seleccionados con percoll. Se utilizaron 20 pares de epidídimos de toros, se obtuvieron los espermatozoides mediante el método de recolección por flujo retrógrado totalizando 7 pulls de muestras espermáticas. Cada pull se distribuyó en 4 tratamientos de crio preservación: Glicerol 6%, Glicerol 6% + centrifugación, Dimetilacetamida 6% y Dimetilacetamida 6% + centrifugación. En la centrifugación los espermatozoides fueron obtenidos mediante gradiente de densidad de Percoll al 90%. Se evaluaron la motilidad individual progresiva (%), viabilidad espermática (%), anormalidades morfológicas espermáticas (%) e integridad de membrana espermática (HOECHST/PI %). Se observó un efecto del diluyente (p < 0001), pero no hubo alguna acción del centrifugado (p≥0,05). Al usar el diluyente Glicerol al 6% la motilidad individual progresiva (60,59± 2,94) %, vitalidad espermática (59,47± 2,97) % y la cantidad de células espermáticas con membrana íntegra HOECHST (52,57± 1,59) fueron más elevadas en comparación con Dimetilacetamida 6%, (39,88± 2,94; 23,71± 2,97; 34,73± 1,59) respectivamente. A su vez, existió una interacción (p = 0,02) entre el tipo de diluyente y la centrifugación sobre la vitalidad espermática, donde las muestras de Dimetilacetamida 6% centrifugadas presentaron mayor porcentaje de células vivas, que sin centrifugación. Se concluye que el uso de Dimetilacetamida al 6% como crioprotector es menos eficiente que el Glicerol al 6%, pero la centrifugación previa a la criopreservación seminal con Dimetilacetamida 6% favorece a la calidad espermática.