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Título : Procesos biotecnológicos para el brotamiento y enraizamiento de Cinchona officinalis L., a partir de vitroplantas, en la Argelia-Loja
Autor : Eras Guamán, Víctor Hugo
Chamba Granda, Lorena Melania
Palabras clave : CINCHONA OFFICINALIS
PROPAGACION IN VITRO
ENRAIZAMIENTO
MICROPROPAGACION
Fecha de publicación : 13-abr-2017
Editorial : Loja
Resumen : Cinchona officinalis L. es una especie medicinal que forma parte de la lista de especies promisorias del Ecuador y de la Región Sur del país particularmente. Esta especie emblemática ha sido sobreexplotada debido a sus propiedades curativas quedando solamente pequeños relictos boscosos en zonas inaccesibles, lo cual ha superado los límites de regeneración natural. Una de las mejores opciones para regenerar plantas en vías de extinción es el uso de herramientas biotecnológicas como la micropropagación, mismas que se constituyen en una alternativa idónea para propagar plantas, mediante las técnicas de cultivo in vitro se puede incrementar el número de individuos por unidad de superficie de cualquier especie objeto de conservación, en este contexto la micropropagación de la especie Cinchona officinalis L., se realizó con el propósito de generar información sobre los procesos biotecnológicos, que permitan la propagación in vitro de Cinchona officinalis L. con fines de conservación. El presente trabajo de investigación se desarrolló en el marco del proyecto de investigación “Identificación y descripción del estado actual de Cinchona officinalis L., en la provincia de Loja y generación de protocolos para la propagación in vivo e in vitro”, en su fase de laboratorio, mismo que tuvo lugar en el Laboratorio de Micropropagación Vegetal de la Universidad Nacional de Loja. Para la micropropagación de Cinchona officinalis L. se utilizó medio de cultivo basal MS (Murashige y Skoog 1962), adicionando diferentes reguladores de crecimiento, tanto en la fase de brotamiento, como de enraizamiento. Para la fase de brotamiento in vitro de Cinchona officinalis L., se combinó auxinas y citoquinas en diferentes concentraciones: ANA en concentraciones de 0,5 y 1,5 mg/l y BAP en concentraciones de 2,5; 3,0 y 3,5 mg/l). En esta fase se evaluaron variables como número de brotes por explante, longitud de brote, número de nudos y hojas por brote. La combinación hormonal 0,5 mg/l ANA + 2,5 mg/l BAP resultó ser la más efectiva en cuanto a la formación de brotes, número de nudos y hojas, obteniéndose resultados de 6,06 brotes por explante, con 2,92 nudos, 6,20 hojas por brote. En cuanto al tamaño de los brotes el mejor resultado se obtuvo en la combinación hormonal 1,5 mg/l ANA + 3,0 mg/l BAP, dando una altura de 17,68 mm por brote. Para la fase de enraizamiento in vitro de Cinchona officinalis L.se utilizó ANA, AIA y AIB en concentraciones de 0,1; 0,5 y 1,0 mg/l. Las variables de respuesta a evaluar fueron número de raíces, longitud de raíces, número de brotes por explante, longitud de brotes, formación de nudos y formación de hojas. La concentración hormonal 1,0 mg/l ANA resultó ser la más efectiva para las variables número de raíces por explante y longitud de raíz, en el cual se obtuvo 5,31 raíces por explante, con una longitud de raíces de 2,45 mm; cabe señalar que las raíces obtenidas en este tratamiento corresponden a raíces adventicias, formadas a partir de organogénesis indirecta o callos. En la concentración hormonal AIB 1,0 mg/l se observó la formación de raíces por organogénesis directa, con un promedio de enraizamiento de 0,75 raíces por explante con un tamaño de 0,74 mm. Por otro lado, para las variables de brotamiento y longitud de brotes evaluadas en la fase enraizamiento, la concentración hormonal 0,5 mg/l ANA resultó ser la más efectiva, donde se obtuvo un promedio de 3,74 brotes por explante con una longitud de 31,29 mm. Sin embargo, para las variables de formación de nudos y hojas la concentración hormonal 0,1 mg/l ANA resultó la más favorables, dando resultados promedio de 2,92 nudos con 6,20 hojas por brote. Palabras clave: Cinchona, in vitro, micropropagación, brotamiento, enraizamiento.
Descripción : Cinchona officinalis L. is a medicinal plant species that is part of the list of promising species from Ecuador and the Southern Region in particular. This emblematic species has been overexploited due to its curative properties leaving only small relics in inaccessible areas, which has exceeded the limits of its natural regeneration. One of the best options to regenerate endangered plants is the use of biotechnological tools such as micropropagation, which constitute of an ideal alternative to propagate plants, through in vitro culture techniques that can increase the number of individuals per unit of surface area of any species subject to conservation. In this context the micropropagation of the species Cinchona officinalis L. was carried out with the purpose of generating information about the biotechnological processes that allow the in vitro propagation of Cinchona officinalis L. for conservation purposes. The present research work was carried out within the framework of the research project "Identification and description of the current status of Cinchona officinalis L., in the province of Loja and generation of protocols for in vivo and in vitro propagation”, which took place at the plant micropropagation laboratory of the National University of Loja. For the micropropagation of Cinchona officinalis L. basal culture medium MS (Murashige and Skoog 1962) was used, and different growth regulators were added both in the budding and rooting phases. For the in vitro budding phase of Cinchona officinalis L., auxins and cytokinines were combined in different concentrations: ANA was used at a concentration of 0.5 and 1.5 mg/l and BAP was used at a concentration of 2.5; 3.0 and 3.5 mg/l). In this phase, variables such as the number of shoots per explant, shoot length, number of knots and leaves per shoot were evaluated. The hormonal combination 0.5 mg/l ANA + 2.5 mg/l BAP was the most effective in terms of shoot formation, number of knots and leaves, obtaining results of 6.06 shoots per explant, with 2.92 knots and 6.20 leaves per shoot. Regarding the size of the shoots, the best result was obtained by the hormonal combination of 1.5 mg/l ANA + 3.0 mg/l BAP, giving a height of 17.68 mm per shoot. For the in vitro rooting phase of Cinchona officinalis L., ANA, AIA and AIB were used in concentrations of 0.1, 0.5 and 1.0 mg/l respectively. The evaluated response variables were root number, root length, shoot number per explant, shoot length, knot formation and leaf formation. The hormonal concentration of 1.0 mg/l ANA was found to be the most effective for the number of roots per explant and root length, in which 5.31 roots per explant were obtained, with a root length of 2.45 mm. It should be noted that the roots obtained in this treatment correspond to adventitious roots, formed from indirect organogenesis or calli. In the hormonal concentration of AIB 1.0 mg/l root formation was observed by direct organogenesis, with an average rooting of 0.75 roots per explant with a size of 0.74 mm. On the other hand, for the sprouting variables and length of shoots evaluated in the rooting phase, the hormonal concentration 0.5 mg/l ANA was the most effective, with an average of 3.74 shoots per explant with a length of 31.29 mm. However, for the variables of knot and leaf formation the hormone concentration of 0.1 mg/l ANA was the most favorable, giving average results of 2.92 knots with 6.20 leaves per shoot.
URI : http://dspace.unl.edu.ec/jspui/handle/123456789/18546
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