Viabilidad de Acanthamoeba castellanii frente a virus nucleocitoplasmáticos de ADN de gran tamaño

Abstract

Los virus gigantes (GV) son entes ubicuos igual que sus hospederos. El reconocimiento de Acanthamoeba castellanii como hospedero de laboratorio por excelencia para identificar GV, es una herramienta para inquirir en ecosistemas aún inexplorados en materia de GV, la cual consiste en reconocer la viabilidad de la ameba frente a una posible infección viral. Esta investigación desarrolló cultivos axénicos de Acanthamoeba castellanii diluidos y cultivos monoxénicos de Acanthamoeba castellanii con inóculos ambientales con sospecha de presencia de GV provenientes de las lagunas de Daniel Álvarez, Jipiro, Punzara y Carigán, pertenecientes a la ciudad de Loja, Ecuador. Las inoculaciones de muestras ambientales se realizaron en tres concentraciones (1:1, 1:10, 1:20) por triplicado. Se efectuaron curvas de infección del número de células con efectos citopáticos (CPE) registrados del análisis de imágenes mediante microscopía de lapso de tiempo (148 h) y análisis estadísticos (MDS). Se compararon los CPE registrados en este estudio con los de estudios publicados, para determinar los posibles GV infectantes. Así, se logró obtener cepas activas de cultivos axénicos diluidos con una disposición espacial que posteriormente a la generación de cultivos monoxénicos, permitió la captura de imágenes microscópicas e identificación de CPE. Los inóculos ambientales 1:1 y 1:10 no fueron significativamente diferentes, mientras que los 1:20 sí. Los tratamientos de las lagunas de Jipiro, Carigán y Punzara mostraron desprendimiento de la monocapa, disminución del tamaño, redondeo celular y de vacuolas y, lisis celular, por la posible presencia de Mimivirus; mientras que los tratamientos de la laguna Daniel Álvarez Burneo, mostraron adicionalmente racimos celulares, por la presunta presencia de Tupanvirus. Así, se concluye que la viabilidad de Acanthamoeba castellanii se vio comprometida diferencialmente respecto de las muestras ambientales inoculadas, de las cuales se visualizaron CPE distintos ocasionados por la interacción entre amebas y posiblemente GV.