Procesos biotecnológicos para la proliferación y enraizamiento in vitro de Hualtaco Laxopterygium huasango Spruce ex Engl., proveniente del bosque seco de la provincia de Loja

Abstract

La micropropagación vegetal es una herramienta útil para la conservación de especies amenazadas, pues mediante las técnicas de cultivo in vitro se puede incrementar el número de individuos por unidad de superficie de cualquier especie objeto de conservación. En este contexto la micropropagación de la especie Loxopterygium huasango Spruce ex Engl., se plantea como una alternativa de propagación vegetal, ya que esta técnica permite tener un mayor conocimiento de los factores fisiológicos y ambientales involucrados en la formación de órganos adventicios, mediante la propagación in vitro. Bajo esta perspectiva se realizó la presente investigación “Procesos biotecnológicos para la proliferación y enraizamiento in vitro de Hualtaco Loxopterygium huasangoSpruce ex Engl., proveniente del bosque seco de la provincia de Loja”, la misma que consistió en desarrollar ensayos de laboratorio para la desinfección de semillas y explantes de campo, germinación in vitro de semillas, multiplicación, brotamiento y enraizamiento de explantes provenientes de plántulas obtenidas in vitro, contribuyendo de esta manera a generar información para el establecimiento de protocolos de propagación in vitro de Loxopterygium huasango Spruce ex Engl. La presente investigación se desarrolló en el marco del proyecto “Generación de protocolos para la propagación in vivo e in vitro de genotipos élites de especies forestales nativas y promisorias para la reforestación en la región sur del Ecuador" en dos fases: fase de campo y fase de laboratorio; durante el periodo comprendido entre noviembre 2013 hasta diciembre del 2014, la fase de campo correspondió a la recolección de material vegetal en los sectores: Lucarqui – Bramaderos (cantón Paltas), Puente Internacional – Vizin (cantón Macará) y Limones (Zapotillo); y la segunda fase se llevó a cabo en el Laboratorio de Micropropagación Vegetal de la Universidad Nacional de Loja. En todos los experimentos se utilizó el medio de cultivo basal MS (Murashige y Skoog 1962), suplementado con diversos reguladores de crecimiento. En el ensayo de desinfección de semillas se empleó hipoclorito de sodio (cloro comercial) en tres concentraciones (25, 50 y 75%), con tres tiempos de inmersión (5, 10 y 15 min) respectivamente, donde el 50% hipoclorito de sodio durante 5 minutos fue el mejor tratamiento para controlar la contaminación. Para la desinfección e implantación in vitro de explantes de campo, se realizó la colecta del material vegetal en los cantones Zapotillo, Macará y Paltas, la desinfección se realizó empleando hipoclorito de sodio (cloro comercial) en tres concentraciones (15, 20 y 25%) con dos tiempos de inmersión (5 y 10 min) respectivamente, pero ninguno de los tratamientos ensayados permitió controlar la contaminación de los explantes de campo. Para la germinación in vitro se aplicó tres métodos de escarificación (sin escarificación, física y mecánica) con tres concentraciones de AG3 (0; 0,5 y 1 mg/L), alcanzándose el mayor porcentaje de germinación 77,78% en el tratamiento sin escarificación y la adición de 1 mg/L de AG3. Para los ensayos de multiplicación, brotamiento y enraizamiento in vitro de explantes (ápices caulinares y segmentos nodales), se utilizó plántulas germinadas in vitro de 4 a 5 cm de altura y de 1 a 2 nudos para la obtención de los explantes. En el ensayo de multiplicación in vitro se utilizó tres citocininas: benzilaminopurina (BAP), kinetina (KIN) e isopentiladenina (2ip), en dos concentraciones 1 y 2 mg/L respectivamente, resultando la citocinina 2ip en concentración de 1 mg/L el mejor tratamiento. Para el brotamiento in vitro se utilizaron las citocininas BAP. KIN y 2ip en concentración de 1 mg/L, suplementadas con sulfato de adenina 5 y 25 mg/L y agua de coco 0 y 20%, lográndose los mejores resultados con 1 mg/L 2ip + 5 mg/L sulfato de adenina y 0% de agua de coco. Para el enraizamiento in vitro se probó tres auxinas: ácido naftalenacético (ANA), ácido indolacético (AIA) y ácido indolbutírico (AIB) en tres concentraciones (0,5; 1 y 1,5 mg/L) respectivamente, alcanzándose los mejores resultados con 1,5 mg/L AIA, pues se logró inducir el mayor número de raíces formadas por explante.